Pipetler, çok küçük hacimlerdeki sıvıları ölçmek ve aktarmak için kullanılan laboratuvar ekipmanlarıdır. Pipet ölçümlerinde doğruluk çok önemlidir çünkü pipetin düşürdüğü hacimdeki farklılıklar deney sonuçlarını etkileyebilir. Doğruluğu sağlamak için pipet kalibrasyonunu birkaç ayda bir kontrol etmek önemlidir. Kalibrasyon işlemi, gerektiğinde onarımların yapılabilmesi için bu ekipmanın doğru hacimde sıvı damlatıp damlamadığını kontrol etmek için kullanışlıdır.
Adım
Bölüm 1 / 2: Kalibrasyonu Kontrol Etme
Adım 1. Gerekli malzemeleri toplayın
Pipetin kalibrasyonunu kontrol etmek için bir pipet, pipet uçları, damıtılmış su, beher, termometre, terazi ve tartı kabı gereklidir. Mikropipetin maksimum 1 L değerinde kalibre edilmesi için kullanılan terazi mikrogram ölçeğinde olmalıdır.
- 5 ml'den fazla suya ihtiyacınız olmayacak. Beheri suyla doldurun.
- Pipet ucunun doğru olduğundan ve pipete tam oturduğundan emin olun.
Adım 2. Damıtılmış suyun sıcaklığını ölçün
Termometreyi suya koyun ve en az bir dakika bekletin. Termometrenin kırmızı çizgisi hala hareket ediyorsa bir dakika daha bekleyin. Bir dakika sonra sıcaklığı kaydedin. Termometreyi alın ve işiniz bittiğinde kurulayın.
Suyun sıcaklığını bilmek önemlidir, çünkü kalibrasyonu kontrol etmek için yapılan hesaplamalarda kullanılacaktır
Adım 3. Tartı kabını terazinin üzerine yerleştirin ve teraziyi sıfırlayın
İdeal olarak, kullanılan terazinin bir kapısı ve içinde yalıtılmış bir boşluk vardır. Tartım kabını terazi haznesine yerleştirin ve kapağı kapatın. Terazinizde bölme ve kapı yoksa, terazinin üzerine bir tartı kabı koymanız yeterlidir. “Sıfır” veya “Dara” düğmesine basın ve terazinin sıfır göstermesini bekleyin.
Baskülün sıfırlanması plastik bardağın ağırlığını azaltır ve sadece bardağa konulan maddenin ağırlığını tartmanıza olanak tanır
Adım 4. Kalibrasyon için pipeti hazırlayın
Başlamadan önce pipeti etanol ile silin ve pipetin ucunu hiçbir şeyin tıkamadığından emin olun. Doğru pipet ucunu pipet ucuna takın ve test edilecek hacmi belirleyin.
Kalibrasyon için pipetten çıkarılabilecek en küçük ve en büyük hacimleri test edin
Adım 5. Kalibrasyondan önce pipet ucunu yıkayın
Düğmeye ilk sınıra kadar basın ve pipetin ucunu yaklaşık 2 mm derinliğe kadar damıtılmış suya daldırın. Sıvının bir kısmını emmek için düğmeyi bırakın ve ardından düğmeye basarak sıvıyı tekrar bırakın. Kullanmadan önce damlalık uçlarını yıkamak için bu adımı üç kez tekrarlayın.
Pipet ucunda kalan sıvıyı çıkarmak için düğmeye ikinci sınıra kadar basın, ardından pipeti sudan çıkarın
Adım 6. Kalibrasyon hacmini emdirin
Damıtılmış suyun dışına yerleştirilmiş pipet ucu ile düğmeye ilk sınıra kadar basın. Pipet ucunu 2 mm derinliğe damıtılmış suya batırın ve sıvıyı pipet ucuna emmek için düğmeyi bırakın. Damlalık ucunu sudan çıkarmadan önce yaklaşık 1 saniye bekleyin.
Aspirasyon işlemi sırasında pipet ucunun tamamen daldırıldığından emin olun. Damlalık ucunda kabarcık olmamalıdır, aksi takdirde sonuç yanlış olabilir
Adım 7. Sıvıyı terazinin üzerindeki tartı kabına dökün
Pipet ucunu tartım kabının altına yerleştirin ve ardından pipet düğmesine ilk sınıra kadar basın. Sudan biraz uzakta başka bir noktaya gidin, ardından ikinci sınıra kadar düğmeye basın. Düğmeyi basılı tutarak pipet ucunu tartım kabından kaldırın.
Diğer kalibrasyon testleri için tekrar kullanacağınız için ucu pipete bağlı tutun
Adım 8. Terazide gösterilen ağırlığı kaydedin
Kapı terazisi kullanıyorsanız terazi kabininin kapağını kapatın. Rakamlar artık değişmeyene kadar bekleyin. Defterine yaz.
Bunları yazmadan önce ölçekteki sayıların tekrar değişmemesini beklemek önemlidir. Beklemezseniz notlar yanlış gidecek
Adım 9. Okumayı en az 10 kez gerçekleştirmek için bu işlemi tekrarlayın
Teraziyi tekrar sıfırlayın, kullanmadan önce pipet uçlarını yıkayın, aynı hacimde sıvıyı emdirin, hacmi çıkarın ve ardından ağırlığı kaydedin. Aynı hacim için damıtılmış suyun ağırlığını kaydedin, ardından tüm notlarınızın ortalamasını alın.
Her birim birden çok kez test edilirse bu işlemi farklı birimler için tekrarlayabilirsiniz
Bölüm 2/2: Kalibrasyon Sonucunun Hesaplanması
Adım 1. Hesaplanan hacim için formülü tanımlayın
Pipet tarafından püskürtülen sıvının hacmini hesaplama formülü V = w * Z'dir, w suyun ağırlığıdır, Z, suyun yoğunluğuna dayalı dönüşüm faktörüdür, V ise su miktarının hacmidir. kaldırıldı.
- Değişken Z, deneyin başlangıcında kaydedilen sıcaklık kullanılarak suyun yoğunluğu hesaplanarak elde edilebilir.
- Örneğin: Su sıcaklığı 23°C ise Z değeri 1.0035 g/mg'dir.
Adım 2. Pipet kalibrasyonlarının genel ortalamasını hesaplayın
Pipet tarafından salınan su hacmi en az on kez tartılmıştır. Tüm bu değerlerin ortalamasını almak için hepsini toplayın ve 10'a bölün. İşlemin çoğunu veya daha fazlasını yaptıysanız, genel sonuçları toplayın ve ardından gerçekleştirilen deneme sayısına bölün.
- Örneğin: 10µL pipetle yaptığınız 10 deneyden elde edilen suyun ağırlığı şu şekildedir: 9, 89, 10, 01, 10, 02, 9, 99, 9, 95, 10, 04, 9, 96, 10, 01, 9, 99 ve 9, 98.
- Ortalama: (9, 89 + 10, 01 + 10, 02 + 9, 99 + 9, 95+ 10, 04 + 9, 96 + 10, 01 + 9, 99 + 9, 98)/10 = 99, 84/10 = 9,984
Adım 3. Değişkenleri denkleme yerleştirin ve çözün
Her değişken için doğru sayıyı belirledikten sonra, onu formüle ekleyin ve hesaplanan hacmi tamamlayın. Bu denklemi çözmek için, tüm denemelerin ortalama ağırlığını Z değeriyle çarpmanız yeterlidir.
Örneğin: V = w * Z = 9.984 * 1.0035 = 10, 019
Adım 4. Pipetin doğruluğunu hesaplayın
A = 100 x V denklemini kullanınortalama/V0 Pipet doğruluğunu hesaplamak için. A pipet doğruluğunu gösterir, Vortalama hesaplanan ortalama hacim ve V0 pipette ayarlanan değerdir. Doğruluk değeri %99-101 arasında olmalıdır.
- Pipet uygun şekilde kalibre edilmişse, hesaplanan değer pipet üzerinde ayarlanan gerçek değere çok yakın olmalıdır.
- Örneğin: A = 100 x Vortalama/V0 = 100 x 10, 019/10 = 100 x 1.0019 = %100,19
- Bu pipet uygun şekilde kalibre edilmiştir.
Adım 5. Gerekirse pipeti kalibrasyon için gönderin
Pipetiniz kalibrasyon testini geçemezse, hemen deneme için kullanmayın. Pipetler çok kırılgan ve pahalı laboratuvar ekipmanlarıdır. Kalibrasyonu kendiniz düzeltemezsiniz, pipetin onarım için gönderilmesi gerekir. Alternatif olarak, birkaç şirket laboratuvarınıza gelecek ve pipeti yerinde kalibre edecektir.
